关爱白癜风健康惠民活动 http://pf.39.net/bdfyy/dbfzl/171020/5777826.html鸡病毒性关节炎是由禽呼肠孤病毒(Avianreovirus，ARV)引起的幼龄鸡的一种重要传染病。由于病鸡运动障碍，生长迟缓，从而导致淘汰率增高，使丧失经济价值的鸡高达30～50％。同时，禽呼肠孤病毒的传播与鸡的应激性有关，对鸡整体免疫水平有一定程度的抑制，可造成鸡新城疫、马立克氏病等免疫效价的降低。近期瑞普生物疫病诊断研究服务中心分别从山东、广西、河南、湖北等大型养殖场分离到ARV病毒。瑞普生物疫病诊断中心从该病的致病症状、发病率及序列分析中发现，目前国内鸡病毒性关节炎呈现出发病率高、致病力强和难以预防的特点。本文对诊断中心分离的2例REV(HuBHeN)病毒进行了检测及序列分析。1临床症状本病常呈隐性感染，如急性感染，病鸡食欲及活力减退，不愿走动，驱赶时勉强移动，步态不稳，继而出现跛行或单脚跳跃。检查病鸡可见单侧或双侧蹑部、跗关节肿胀。在日龄较大的肉鸡中可见腓肠腱断裂导致顽固性跛行（如图1图2）图1图22病理变化病鸡跗关节周围肿胀，切开皮肤可见到关节上部腓肠腱水肿，滑膜内有充血或点状出血，关节腔内含有淡黄色或血样渗出物，少数病例的渗出物为脓性。腱鞘内有血液或淡黄色的炎性渗出物，滑膜出血水肿，腓肠肌腱断裂或坏死。慢性病例可见腓肠肌腱增生硬化。有时可见心肌炎和肝脏坏死。3病原分离鉴定（1）鸡胚病变通过肿胀的腱鞘、跗关节的关节液进行病毒分离。病料研磨后收取研磨液，以绒毛尿囊膜的方式接种于9～11日龄SPF鸡胚，鸡胚接种后3～5天死亡，绒毛尿囊膜增厚并出现红色痘斑样病变。剖检鸡胚：胚体出血，内脏器官充血、出血，胚体呈紫红色（如图3图4）。图3图4（2）聚合酶链反应（PCR）将病料研磨液以绒毛尿囊膜的方式接种于9～11日龄SPF鸡胚，37℃培养，收获3～5天死亡鸡胚的绒毛尿囊膜与胚体，按RNAisoplus试剂说明书提取病毒基因组RNA。反转录获取RT-PCRS1基因σC片段,阳性会获得bp左右的特异性条带。图5M：DLDNAMarker；1：HeN株；2：HuB株；3：阳性对照；4：阴性对照；（3）ARVS1基因同源性分析应用DNAStar软件对测得的ARVHeN株与HuB株S1基因中σC蛋白基因核苷酸序列与其他参考毒株进行同源性比较（图6）。构建ARVσC蛋白核苷酸序列遗传进化树（图7）。图62个分离株S1基因与参考毒株的同源性比较图7ARVS1基因遗传进化树从遗传进化树（图4）分析结果看，在σC蛋白基因上，ARVHeN株与HuB株与参考毒株ARV、ARV与ARVS株、MDRVYH和MDRVYJL的遗传进化关系最密切，与ARV毒株的进化关系较为疏远，同时与近几年中国分离ARV毒株的遗传进化关系也非常密切，说明近几年中国ARV毒株未发生大的变异。4总结通过对测得的禽呼肠孤病毒HeN株和HuB基因的核苷酸序列与参考毒株的σC蛋白基因的核苷酸序列的同源性分析比较，结果发现：（1）ARVHeN和HuB分离株与加拿大分离到的禽呼肠孤病毒强毒株ARV同源性最高，在99.7%和99.9%之间；与美国分离到的禽呼肠孤病毒ARV的同源性为98.3%和98.5%；与加拿大的另一株禽呼肠孤病毒分离株ARV的同源性分别为81.8%和81.7%。（2）两株病毒与国内近几年分离毒株同源性非常高，在99.0～99.7%。
通过以上分析得出，禽呼肠孤病毒近几年S1基因并没有大的变异性，但是致病力与ARV和相近，与致病力低的ARV较远，容易给生产实践带来很大影响。面对日益严重的ARV发病情况，我们不容忽视，目前国内只存在进口疫苗或用美国S毒株制备疫苗以预防鸡病毒性关节炎。从基因上分析，国内禽呼肠孤病毒基因序列存在一定的差异性，需要我们为筛选适合中国的鸡病毒性关节炎疫苗株做一定准备。
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